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两激光可以做超过20色的流式实验吗?

418 人阅读发布时间:2020-04-24 14:46

很长时间以来,在两激光配置的流式细胞仪上,开发基于荧光染料的多色流式实验一直被限制在大约10种颜色。两个主要的原因限制了更多色实验的进一步拓展,一是流式细胞仪的硬件设计,双激光系统一般只配置10个甚至更少的检测器;二是传统的光学设计,即一个检测器对应一个荧光染料。

Cytek® Northern Lights流式细胞仪,两激光(405&488 nm)仪器配置的荧光检测器达到30个,仅用两激光配置即可帮助实验人员从数据中获得更多的信息。最近,Cytek开发了一个两激光21色的人免疫分型方案,仅从一管样本获取,便可获得具有卓越分辨率的数据。
 

/ 21色方案 /

解冻的人外周血单个核细胞进行样本处理后,进行染色,并在Cytek® Northern Lights 两激光流式细胞仪(405&488nm)上完成获取和数据分析。21色方案所使用的标记(图1),以及21个荧光试剂的光谱重叠(图2)展示如下。
两激光可以做超过20色的流式实验吗?
21个荧光素的光谱重叠图是使用Cytek光谱查看器创建的,该查看器可以在Cytek网站上找到,网址是https://spectrum.cytekbio.com。
两激光可以做超过20色的流式实验吗?

 

/ 21色方案的结果展示 /

这个21色方案是Cytek之前开发的24色方案(Cytek Northern Lights 3激光系统)和40色方案(Cytek Auror5激光系统)的一个子集。由于方案是使用解冻的人类PBMC样本进行演示的,所以在方案里还添加了一个24色和40色方案中不存在的死活染料标记。
两激光可以做超过20色的流式实验吗?

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