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Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)

1495 人阅读发布时间:2020-07-30 13:56

Cytek Aurora 和Northern Lights全光谱流式细胞仪系列,正在全世界各地,帮助科学家们用一到五激光进行复杂的多色实验。其独特的光学系统,使得荧光染料的选择范围更为广泛,在贡献更好分辨率的情况下,允许使用更多甚至是峰值光谱高度重叠的荧光染料。一种配置,满足多种实验需求,不仅提供更加丰富的数据信息,并且能够节省实验成本和设置时间,最大限度地减少实验误差,为使用者带来全新的实验体验。

在上篇中,我们已经介绍了1-3激光的多色方案及数据,今天,我们将介绍Cytek光谱流式3-5激光多色方案,及基于这些方案做出的高质量数据,精彩不容错过!


I. 三激光24色免疫细胞检测方案

更加灵活,更多选择,更低成本,轻松设置

Cytek光谱流式独特的光学设计,结合SpectroFlo®软件强大的解析能力,无需更换滤光片,即可实现更多颜色组合的方案设计,灵活方便,同时提供高质量的多参数数据。 基于Cytek三激光配置设计的24色人外周血免疫细胞亚群检测方案,可帮助全面分析T/B淋巴细胞及功能亚群,Treg细胞,B细胞,NK/NKT细胞,单核细胞,粒细胞等信息,方案及结果显示如下。
Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)

 

II. 五激光28色自身免疫性疾病研究方案

更多通道,更多可选染料

在三激光配置的基础上,增加紫外和黄绿激光,新激光器的加入,使总的激光通道数升至64个,赋予了Aurora更高的检测能力,也使基于光谱流式的应用进入了下一个阶段。
Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)
 

28色方案

选择与OMIP-44相似的细胞标记,设计基于光谱的28色自身免疫性疾病研究方案。将人外周血单个核细胞经过处理,在5激光配置的Aurora上进行获取,方案及结果显示如下。
Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)

 

III. 五激光35色免疫研究方案

深入探索变得容易

光谱流式的优势不仅是可以使用高度重叠的染料,其内置的优化增益设置,无需调节电压和补偿,通过光谱解析,便可以轻松得到高分辨率的分群结果。

针对需要深入探索免疫细胞亚群及功能的研究者,我们基于5激光Aurora设计了一个35色免疫研究方案,该方案目前已被欧美许多研究COVID-19的实验室采纳并使用。方案及结果显示如下。
Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)


 

IV. 五激光40色免疫研究方案

将理想变为现实

很长一段时间以来,开发基于荧光素的40 色流式细胞术检测方案,都被认为只是一种空想。许多有着多参数实验需求的研究者只能转向寻找其他替代技术。然而,前不久,Cytek 成功开发了一个40色的免疫分型方案,仅从一根试管中进行细胞获取,便可获得具有出色分辨率的实验结果。

使用OMIQ软件(www.omiq.ai)进行FlowSOM 和 t-SNE-CUDA 分析(双重态,聚集体和死亡细胞被排除在分析之外)。利用FlowSOM 确定了45个细胞群落,如下图所示。
Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)
40色方案的t-SNE-CUDA分析 图(用不同颜色代表不同的标记表达)如下图所示,标记是按主要的细胞亚群进行了分组。
Cytek多色方案一饱眼福—下篇(三至五激光篇)

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