无需等待！Amnis™成像流式助力“现成型”体内CAR-T疗法研发

体外嵌合抗原受体(CAR) T细胞疗法在治疗B细胞恶性血液肿瘤上取得了极大的成功，但是由于CAR-T细胞疗法需要获取患者自身的T细胞在体外进行改造，程序复杂、治疗周期长且价格昂贵，并且其对实体瘤的治疗效果有限，此外，CAR-T细胞疗法还会导致一些副作用，例如细胞因子释放综合征、神经毒性、脱靶效应、过敏反应以及继发性T细胞恶性肿瘤等。因此，迫切需要创新的策略来克服目前自体CAR-T细胞治疗所面临的重大挑战和局限性。

基于上述背景，国际制药巨头赛诺菲公司开发了一种新型体内CAR-T平台，并将该研究成果发表在Molecular Therapy（IF:12）期刊上。该新型递送平台采用脂质纳米颗粒（LNP），将编码CD22 CAR的mRNA封装在内。在对LNP的设计中，优选了低毒性的“脂质15”作为核心载体，并严格把控mRNA的纯度以避免过度炎症反应。此外，还对LNP的粒径、表面电荷及PEG脂质等多项理化特性都经过严格地优化，优化了高效的内体逃逸，并避免肝脏清除以及非特异性细胞转染等情况。进一步，通过在LNP表面修饰抗CD8的纳米抗体（Nb8-H3）实现了其对CD8⁺T细胞的高度特异性靶向结合，提升LNP与T细胞的结合率和转染效率。体外实验证实了LNP转染T细胞后在体外发生了CAR表达，并可介导靶细胞杀伤。此外，在人源化Nalm6肿瘤小鼠模型上的实验进一步证实了，靶向的LNP介导了显著且特异性的CD8⁺T细胞转染，在小鼠体内产生了功能性CAR-T细胞，可实现安全重复给药并高效清除肿瘤。该体内CAR-T平台有效规避了自体CAR-T疗法耗时、昂贵等局限性，具备极高的临床应用潜力。

图1：图形概要

本研究中Amnis™成像流式系统的应用

由于可规避传统自体CAR-T细胞疗法的诸多缺点，体内CAR-T研究热度在近些年来持续攀升。赛诺菲科研团队近期创新性地开发了一种安全可靠的体内CAR递送平台，并且体内重编程的CAR-T细胞展现出了高效的B细胞血液肿瘤杀效果，有望成为一种真正的“现成型”（off-the-shelf）CAR-T细胞疗法，克服目前获批的自体体外CAR-T疗法的重大障碍，具有极高的临床应用前景。

Amnis™成像流式系统不仅可以清晰地呈现出CAR在T细胞表面的表达，还能眼见为实检测出CAR-T细胞和肿瘤细胞间之间形成的免疫突触，高通量的检测加上强大的软件分析系统，使其可对CAR-T与肿瘤细胞之间形成的免疫突触进行定量的精准统计，更加高效、精确和客观地评估CAR-T细胞的杀伤效果，是检测CAR-T细胞的绝-佳利器！