Cytek分析分选极光二重奏，谱写“无助”CD8+记忆T细胞的命运交响曲（内附视频）

功能性CD8⁺记忆T细胞（Tmem）的形成常常离不开它的“得力助手” -- CD4⁺T细胞，然而，在某些急性感染情况下，绕开CD4⁺T细胞的辅助，并不影响效应及记忆CD8+T细胞的生成，形成所谓的“无助”CD8⁺T细胞。“无助”CD8⁺T细胞的起源与长期命运，至今仍未完全阐明。来自美国西奈山伊坎医学院的Verena van der Heide等研究人员，通过构建的小鼠感染模型首次揭示了长期抗原呈递导致了“无助”CD8⁺T细胞记忆性的短暂功能缺陷，该项成果发表于免疫学期刊《Immunity》¹。

近期，文章一作Verena van der Heide博士，为我们带来了一场精彩的讲座：Helpless Not Hopeless: Applying Cell Sorting And High-Dimensional Flow Cytometry For Long-Term Characterization Of Murine Pathogen-Specific CD8+ T Cells，深入浅出地解读了这项突破性成果的来龙去脉。

图1 - 长期抗原呈递导致“无助”CD8⁺记忆T细胞的可逆缺陷

研究人员构建了小鼠急性自限性感染模型，以追踪抗原特异性CD8⁺T细胞的长期演化。贯穿全文的Cytek^® Aurora™全光谱分析型流式细胞仪与Cytek^® Aurora™CS全光谱分选型流式细胞仪的极光二重奏，可谓是功不可没。通过设计~20-25色的方案，全景式评估了抗原特异性效应与记忆CD8⁺T细胞，进而分选感兴趣的T细胞亚群后，对接下游过继性转移或单细胞测序应用。

图2 – 采用分析与分选流式细胞仪评估小鼠感染模型

图3 – 流式实验方案标志物列表

图4 – CD8+T细胞亚群概念认识

这张生动有趣的图让我们清晰地体会到CD8⁺记忆T细胞在感染过程中扮演的“守护者”角色。“如何”以及“何时”发生演变，是研究人员需要探讨的问题。

图5 - CD8⁺记忆T细胞在二次感染后发挥重要作用

CD4⁺T细胞主要通过以下方式向CD8⁺T细胞提供“帮助”：

1. 通过CD4⁺T细胞分泌IL-2等细胞因子；

2. 活化的CD4+T细胞通过表面的CD40L分子刺激树突状细胞（DC），从而“授权”DC去高效地激活CD8⁺T细胞。

当缺乏CD4⁺T细胞的“帮助”时，将会形成一类有功能缺陷的“无助”CD8⁺记忆T细胞，这在病原体急性感染应答中较为常见，“无助”CD8⁺记忆T细胞对于病原体的再次感染反应较差（图7）。研究人员选择淋巴细胞脉络膜脑膜炎病毒（LCMV）armstrong病毒株感染小鼠模型，针对CD8⁺记忆T细胞的功能缺陷的生物学机制进行探讨。

图6 - “无助”CD8⁺记忆T细胞的起源与发展

图7 - “无助”CD8⁺ T细胞的记忆性功能缺陷

对比发现，“无助”CD8⁺记忆T细胞高表达效应分子如CXCR1、KLRG1、CD43，低表达“记忆”标志物如CD62L、CXCR3等，提示其处于“未成熟”状态。从长时间动态监测结果可以看出，“无助”CD8⁺记忆T细胞仍具有成熟潜力但发育存在延迟，这是暂时且可逆的过程。

图8 - “无助”CD8⁺记忆T细胞的表型记忆成熟被延迟

在“无助”的受体小鼠环境中，野生型病毒感染后观察到CD8⁺T细胞的功能缺陷（图10左下）；而突变型病毒感染组中，T细胞免疫记忆的成熟并未受到限制（图10右下），证实长时间的抗原呈递是产生无助CD8⁺记忆T细胞缺陷的诱因。

图9 – 构建小鼠感染模型评估长时间抗原呈递的影响

图10 – 长时间的抗原呈递是“无助”CD8⁺记忆T细胞缺陷的诱因

本研究中，Cytek全光谱流式分析分选平台的强强联合，将极光二重奏的魅力尽数释放。需要特别指出的是，新成员Cytek Aurora Evo全光谱分析型流式细胞仪同样承袭了Cytek FSP™（Full Spectrum Profiling™）平台的优势，能够实现跨平台方案的无缝衔接，实现高质量结果的跨时空智能互联。

图11 - Cytek FSP平台跨时空智能互联

更多精彩细节，欢迎点击讲座视频回放：

参考文献

van der Heide, V. et al. Prolonged but finite antigen presentation promotes reversible defects of "helpless" memory CD8+ T cells. Immunity 58, doi:10.1016/j.immuni.2025.05.025 (2025).