纳米载药系统内化检测的不二利器 — Amnis™成像流式，不止“看见”，更精准量化

接下来，我们将结合发表于《ACS Nano》（IF: 17.3）的一项研究（Antibody-Free Glycogen Nanoparticles Engage Human Immune T Cells for Intracellular Delivery of Small Drugs or mRNA）³，深入探讨Cytek Amnis成像流式系统在精准量化纳米颗粒内化方面的独到优势。

该文献报道了一种无需抗体修饰的天然糖原纳米颗粒平台，可通过调控颗粒尺寸和表面电荷实现向T细胞的高效胞内递送：小尺寸、低正电的纳米颗粒（BG_EDA，约21 nm）能够缓慢但近乎完全地被T细胞内化，从而比大尺寸、高正电的植物糖原纳米颗粒（PG_EDA，约84 nm）更有效地将载荷白藜芦醇递送入J-Lat A2细胞，使潜伏HIV-1的T细胞高效重启；同时，BG_EDA还可在原代人T细胞中实现mRNA递送，且在原代T细胞中的结合率超过90%。该研究证明，通过合理设计糖原纳米颗粒的物理化学性质，可构建一种单组分、天然无毒、无免疫原性的“无抗体”T细胞递送系统，为小分子药物与mRNA在T细胞相关治疗中的应用提供新思路。

研究者在文章中明确指出Amnis系统可以区分附着在细胞膜表面的纳米颗粒和被细胞内化的纳米颗粒。将标记有AF647的PG_EDA NPs以及BG_EDA NPs的两种纳米载药系统和J-Lat A2 T细胞孵育24小时后，使用Amnis系统检测两种纳米颗粒被T细胞内化的情况。如图1所示，Amnis系统可直观呈现两种纳米载药颗粒被细胞内化的图像，并且使用“Internalization”（细胞内化）这一特征参数，可定量统计真正内化到T细胞内的纳米颗粒。进一步精准检测出与细胞结合的BG_EDA NPs，被细胞内化的比例是100%，而对于PG_EDA NPs来说，这一比例仅有60%，这些定量统计分析结果表明BG_EDA NPs的细胞内化效果更佳。

图1：Amnis成像流式检测PG_EDA NPs和BG_EDA NPs

被T细胞内化的情况

图2：IDEAS软件分析流程及数据展示

Amnis成像流式创新型地结合了高分辨率显微成像与高通量检测，成功打破了传统检测手段在评估纳米颗粒内化时的技术壁垒。正如上述研究所展示的，Amnis系统不仅能“眼见为实”地区分颗粒的表面黏附与真实的胞内摄取，更能依托其专属的“Internalization”参数实现海量细胞级别的精准定量分析。作为纳米载药系统内化评估的“破局利器”，Amnis成像流式系统将持续赋能广大科研工作者，助力在纳米医学、靶向递送及新型免疫疗法等前沿领域加速取得更多创新突破。