匹兹堡大学发表31 参数光谱流式方案，研究战争毒素暴露引发的肺部免疫功能障碍

表1-31参数光谱流式方案的试剂组成

光谱流式方案的设门策略如下图2所示，可分别鉴定出肺和BAL中表达CD11bLow CD11c+ CD64+ Siglec-F+的肺泡巨噬细胞（Alveolar macrophages, AlvMacs ），表达 CD11b+ CD64+ CD24– Siglec-F–肺间质巨噬细胞（Interstitial macrophages, IntMacs），以及，CD4+ T 细胞 (CD3+ CD4+)，CD8+ T 细胞 (CD3+ CD8+)， NK 细胞 (CD3– CD49b+ SSCLow)，嗜酸性粒细胞 (Siglec-F+ CD11b+ CD64– CD11c– F4/80+ SSCHigh)，中性粒细胞 (CD11b+ Ly6G+ CD11c– CD64– SSCHigh)，树突状细胞 (CD11b+/– CD11c+ CD24+ CD64– MHCII+) 和单核细胞 (CD64Low CD11b+ Ly6CInt/+ CD11c– Siglec-F– ) 等细胞亚群。

图1-小鼠肺和BAL免疫分型方案设门策略

研究人员分析发现，在小鼠肺内和BAL中，无论是单独或组合的毒素暴露，AlvMacs ，IntMacs，嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、CD4+ 和 CD8+ T 细胞等细胞群的总体比例都受到了不同程度的影响。其中，在malathion暴露组的BAL中，AlvMac比例降低和中性粒细胞比例升高尤为显著，且BAL的AlvMac还伴有显著的CD206（替代激活标记）和PD-L1（免疫抑制标记）表达增加，及CD86（传统炎症标记） 表达的降低，表明GWTs暴露可以促进肺巨噬细胞中替代激活标记和抑制性受体的表达，而不同毒素可单独或联合诱导独特的先天性免疫反应。GWTs暴露下不同细胞群的变化可参考图2。

图2-毒素暴露诱导的小鼠肺和BAL细胞免疫

利用高维免疫分型，来自肺和BAL的细胞分别被聚类为23个和24个细胞群，并可见GWTs暴露组的优势细胞群与对照组有明显的不同。无论是肺还是BAL样本，毒素暴露后的优势免疫细胞群都具有高表达Ly-6C，CD206，和Siglec-F (仅BAL) 的特征。提示单核细胞来源的巨噬细胞祖细胞在肺和BAL中的募集，是呼吸道GWTs暴露诱导的肺免疫改变的一个重要组成部分。（图3）

图3- 高维免疫分型-GWTs诱导的免疫反应（肺+BAL）

1. Powers, Amy A., et al. "Experimental respiratory exposure to putative Gulf War toxins promotes persistent alveolar macrophage recruitment and pulmonary inflammation." Life Sciences (2021): 119839. https://doi.org/10.1016/j.lfs.2021.119839.