精准先行，全光谱流式助力血液病精准诊疗

血液疾病的精准诊断和精准治疗中，MICM分型是不可或缺的重要成分。MICM分型是国际通用的血液病精准诊断与分型标准，其中属于免疫学范畴的流式细胞术相关实验室检测给血液病临床诊疗提供了很大的帮助。作为血液病的“照妖镜”，高参数流式技术不仅能够帮助临床医生进行精准诊断，为靶向肿瘤细胞的精准治疗提供依据，还能进一步提供患者免疫相关信息，比如肿瘤微环境中的各种免疫细胞及状态，对于评估患者预后以及疾病分层贡献不可或缺的作用。

利用全光谱流式细胞术的高参数检测优势，研究人员得以实现更为精准的血液病诊疗及研究。以下研究分别涉及三种血液病治疗策略，一起看看全光谱流式如何为血液病的精准诊疗提供新思路。
 

过继免疫治疗

免疫治疗尤其是过继免疫细胞疗法在血液肿瘤治疗中取得了显著成效。其中，接受免疫治疗的供者输注物和患者体内的免疫细胞组成，与移植物抗白血病效应（GVL）存在相关性。在Odak, I.等研究者的一项前瞻性研究1中，作者持续两年随访了接受供者淋巴细胞输注（DLI）治疗的13位急性髓系白血病（AML）患者，利用全光谱流式30色方案检测供者和受者的T细胞分化和耗竭指标，发现供者输注物效应记忆T细胞越少，Naïve CD4+，CD8+ T细胞越多，并且患者耗竭CD4+，CD8+效应记忆T细胞越少，CD4+ TEMRACD45RO+ T细胞越多，输注治疗后患者获得持续性缓解概率更大。研究结果说明供者与受者的T细胞组成与DLI治疗后患者的AML缓解率密切相关，对于临床预后判断具有指导价值。

 

图1. 患者治疗情况和研究流程示意图¹

疫苗免疫治疗

急性髓系白血病（AML）作为最常见的成人血液恶性肿瘤，在老年患者中的治疗尤为困难。老年患者存在一系列的并发症以及体能下降等问题，并不适合强化治疗，因此迫切需要新型有效的治疗手段。Wilms’ tumor 1 (WT1) 蛋白在AML中过表达，被认为是很有前景的免疫治疗靶标。Kreutmair, S.等研究者的一项研究2评估了5位经过标准化疗的AML年老患者，持续接种WT1重组蛋白疫苗（WT1-A10）联合佐剂AS01_B的I/II期临床试验效果，研究使用了全光谱流式多参数检测对接种者免疫状态进行评估。结果显示，其中，有3位患者表现出临床获益，5号病人获得了MRD清除，1号病人在第一个疫苗接种周期后就获得超过59个月的长期分子学缓解，3号病人持续18个月缓解后AML复发，但复发的AML WT1缺失表达，说明初始WT1克隆受到抑制。疫苗接种可以激起机体产生有效的体液和细胞免疫反应，诱导T细胞向骨髓浸润，使衰老耗竭T细胞向活化T细胞转变。这项研究为重组蛋白疫苗治疗AML患者提供了新思路。

 

图2. 5号患者T细胞亚群分析²

药物靶向治疗

依鲁替尼用于治疗慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者有显著效果，患者需要持续多年每天服药一次，因此评估药物对于CLL患者免疫细胞的长期影响具有重要价值。Solman, I. G.等研究者持续4年跟踪了31名CLL患者，对比了20名年龄相仿的健康人，并利用全光谱流式细胞术全面评估了24种免疫细胞亚群。依鲁替尼长期服药治疗可以正向调控机体免疫功能，恢复正常B细胞同时靶向降低恶性CLL B细胞数量，恢复Naïve T细胞而降低功能异常的T细胞数量。恢复能够发挥抗肿瘤免疫反应的经典单核细胞和pDC细胞的数量到健康人群水平，而降低发挥免疫抑制作用的Treg，MDSC的数量。长期依鲁替尼药物靶向治疗可以逐渐恢复机体天然免疫和获得性免疫功能，CLL患者临床症状获得持续性缓解。

 

图3. 依鲁替尼治疗4年CLL B细胞和正常B细胞的变化³

 

以上3项研究均使用Cytek^®全光谱流式细胞仪完成免疫细胞的多参数检测，具体方案如下：

 

Cytek^®全光谱流式细胞仪凭借专利的全光谱分析技术（Full Spectrum Profiling^TM, FSP^TM），仅需1管实现更多指标的高灵敏度超多色检测，精细化细胞分群，指数放大信息量，标准化操作提高数据准确性，单管操作提升工作效率，在临床尤其是血液病领域已经获得广泛认可及应用，成为临床工作者实现精准诊疗的“火眼金睛”。

   

参考文献

1Odak, I. et al. Spectral flow cytometry cluster analysis of therapeutic donor lymphocyte infusions identifies T cell subsets associated with outcome in patients with AML relapse. Front Immunol 13, 999163, doi:10.3389/fimmu.2022.999163 (2022).

2Kreutmair, S. et al. First-in-human study of WT1 recombinant protein vaccination in elderly patients with AML in remission: a single-center experience. Cancer Immunol Immunother 71, 2913-2928, doi:10.1007/s00262-022-03202-8 (2022).

3Solman, I. G. et al. Impact of long-term ibrutinib treatment on circulating immune cells in previously untreated chronic lymphocytic leukemia. Leuk Res 102, 106520, doi:10.1016/j.leukres.2021.106520 (2021).