2025年诺贝尔生理学或医学奖揭晓！Cytek®全光谱流式助推Treg细胞前沿研究

2025年诺贝尔生理学或医学奖授予了科学家玛丽·E·布伦科（Mary E. Brunkow）、弗雷德·拉姆斯德尔（Fred Ramsdell）和坂口志文（Shimon Sakaguchi），以表彰他们在外周免疫耐受机制方面的研究贡献，其开创性地发现并定义了调节性T细胞（Regulatory T cell, Treg），并且揭示了免疫系统如何被调控以防止自我攻击。

图1 – 2025年诺贝尔生理学或医学奖揭晓

Cytek聚焦Treg细胞前沿研究

机体免疫耐受表现为对自身抗原或无害外来抗原的耐受性，在胸腺中，表达自身免疫调节分子（AIRE）的髓质胸腺上皮细胞（mTECs）能够清除自身反应性T细胞，并诱导胸腺来源的tTreg细胞分化；而外周Treg（pTreg）细胞的形成一直是未解之谜，来自美国纪念斯隆-凯特琳癌症中心的Rudensky研究团队首次发现肠道淋巴结中一群表达RORγt的抗原呈递细胞与pTreg细胞分化息息相关，该群细胞被命名为Thetis细胞，其在生命早期肠道pTreg细胞诱导和对共生菌群的免疫耐受建立中具有至关重要的作用，这项突破性成果发表于高分学术期刊《Naure》。Cytek^® Aurora™全光谱流式细胞仪与单细胞测序平台联用，以多维度视角深度解析了Thetis细胞。其中，流式实验加入了计数微球对亚群进行绝对计数，值得一提的是，Cytek^® Aurora™全光谱流式细胞仪还可以精准计量进样体积，实现免微球的绝对计数功能。

图3 – 发现并鉴定新型抗原呈递细胞Thetis¹

Treg前体细胞表达CD25（IL-2R的高亲和力亚基），IL-2刺激该受体活化转录因子STAT5以传递信号，进而诱导FoxP3表达。但是，由于IL-2R信号具有多效性，STAT5如何直接靶向Foxp3基因并驱动其表达，目前尚不明确。同样是来自美国纪念斯隆-凯特琳癌症中心的Rudensky带领的研究团队，揭示了IL-2-STAT5信号在启动Foxp3表达时，会精准锁定增强子CNS0（即保守非编码序列0）。CNS0促进IL-2依赖的胸腺Treg细胞分化，并协同其他耐受机制，从而最大限地减少自身免疫，以维持免疫稳态。研究人员通过96孔V底板完成细胞染色，采用Cytek^® Aurora™全光谱流式细胞仪定量检测了小鼠脾脏、肺、外周淋巴结、肠系膜淋巴结等多种组织中Treg细胞及胞内因子的表达。仪器搭载自动化进样装置，能兼容96孔板、384孔板、40孔流式管架，实现无人值守全自动数据采集；软件光谱解析和传统补偿的“双引擎”模式一键式轻松切换，使Cytek^®全光谱流式细胞仪既能轻松兼容传统流式的应用，将复杂实验简单化；也可以拓展实验更多可能性，帮助研究者们突破科学探索的界限。

图4-Foxp3增强子CNS0调控IL-2依赖的Treg细胞²

髓系白血病发生免疫逃逸与Treg细胞的免疫抑制作用息息相关，但是，髓系白血病中促进Tregs生成的机制尚不明确。来自波兰华沙内恩茨基实验生物学研究所的研究人员发现，白血病细胞外囊泡（EVs）的分泌会诱导大量免疫抑制Tregs生成，进而促进白血病的进展。研究人员基于Cytek^® Aurora™全光谱流式细胞仪设计了Treg细胞23色胞内外免疫分型方案，体外培养的Treg细胞经过白血病EVs处理后，进行免疫表型与功能性检测。Cytek^®全光谱流式细胞仪采用专利的全光谱分析（Full Spectrum Profiling™, FSP™）技术，可一键解锁每个荧光染料的光谱全貌，广泛兼容流式染料，轻松突破多色实验瓶颈，为仪器带来极大的灵活性和扩展性。

图5 – 表达4-1BBL白血病细胞外囊泡

驱动促白血病的效应Treg生成³