丙肝治愈后遗留“免疫疤痕”影响乙肝疫苗应答，全光谱流式33/26色方案带您探索内在机制

HBV（乙肝病毒）和HCV（丙肝病毒）感染是慢性肝病的最主要病因，且因共同的传播途径常发生合并感染，相比单一感染带来更高的肝硬化、重度肝病乃至肝癌风险。HCV治愈患者乙肝疫苗的接种十分必须，但部分患者会表现出较弱的疫苗应答。

 

图1. Cytek^® Aurora全光谱流式多色方案绘制HCV治愈患者外周免疫图谱

 

为探索其内在原因，解放军总医院第五医学中心王福生院士团队研究人员使用Cytek^® Aurora全光谱流式33色T细胞/26色B细胞方案精细绘制了HCV治愈患者接种乙肝疫苗前后外周免疫动态图谱，发现HCV感染导致免疫系统的持续改变，表现出高丰度的自身反应性免疫细胞亚群及自身抗体的增加，严重紊乱的适应性免疫系统可能与HCV患者乙肝疫苗应答不佳有关。

 

图2. 乙肝疫苗应答较弱的HCV治愈患者

表现出自身反应性免疫特征

实验方案

 

该工作共招募了13位HCV治愈患者及15位健康志愿者（HC）展开研究，HCV治愈患者接种3剂乙肝疫苗，并在首剂接种后的0、1、6、7月（M0、M1、M6、M7）进行采样。33色T细胞/26色B细胞Cytek^® Aurora全光谱流式方案用于样本检测，以在单一样本中全面获取免疫特征信息（图3）。两组方案共鉴定了27个T细胞亚群及16个B细胞亚群，并根据多种活化、耗竭、杀伤、分化、共刺激、细胞因子受体标志物的表达对各亚群细胞进一步细分。

   

图3. 33色T细胞/26色B细胞方案标志物选择及数据展示

 

HCV感染引起适应性免疫细胞类群丰度持久变化

在HCV治愈患者M0样本与健康组志愿者样本的全光谱流式数据对比中，研究人员发现所鉴定43个细胞类群中的17个类群（39.5%）发生异常的丰度改变（图4）。T细胞群体所受到的影响主要包括Treg细胞丰度的提升、T细胞记忆亚群分布（如初始、过渡记忆亚群的减少和中央记忆亚群的增加）及CD4+T细胞功能极化的改变（如Th22、Th2特征的增加；Th9、Th17++特征的降低）；B细胞群体的改变主要体现为经典静息记忆（RM）群体的减少和Breg、ASC细胞的增加。

 

图4. HCV感染治愈后，免疫图谱仍发生持久改变

部分HCV治愈患者表现出自身反应性免疫特征，与乙肝疫苗应答不佳相关

在全面采集样本免疫图谱后，研究人员对HCV治愈患者免疫特征与乙肝疫苗应答效果的相关性展开研究。13位HCV治愈患者在接种HBV疫苗后，根据M1采样点anti-HBsAg的滴度分为HR组（高应答组，6人）和NR1组（第一剂接种无应答组，7人），并与HC组数据进行对比。其中，Treg细胞、TD/CD8细胞和IgD-only记忆B细胞的表型和丰度的差异在NR1组和HC组间最为显著(图2,5）。结合血浆自身抗体数据，研究人员推测NR1个体表现出高度的自身反应性免疫特征。

 

图5. NR1组个体表现出高度自身反应性免疫特征

总结

得益于Cytek^® Aurora全光谱流式细胞仪强大的多色分析性能，本研究工作为慢性HCV感染引起的系统性免疫失调提供了深入、高维的免疫全景分析。文中数据表明：HCV感染者接种乙肝疫苗的效果受自身反应性免疫亚群持续变化的影响，提示Treg和TD/CD8细胞可作为HCV感染者接种乙肝疫苗时机和应答的评估指标；与此同时，充分的免疫特征评估也在易感人群接种疫苗应答效果预测中具有重要应用前景。

 

 

参考文献

Zhou M J, Zhang C, Fu Y J, et al. Cured HCV patients with suboptimal hepatitis B vaccine response exhibit high self-reactive immune signatures[J]. Hepatology Communications, 2023, 7(7).