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1年连发6篇分选高分文章！费城儿童医院实力诠释全光谱流式分选应用
172 人阅读发布时间：2025-03-17 15:50
背景回顾
费城儿童医院在2019年引进了第一台Cytek® Aurora™全光谱流式分析仪，之后的5年间，又陆续购入Cytek Aurora全光谱流式分析仪和Aurora CS全光谱流式分选仪。目前，实验室已经拥有了3台全光谱流式分析仪和2台全光谱流式分选仪，仪器的使用频率非常高，短短几年间成果斐然，发表了众多全光谱流式细胞仪高分文章，仅2024年这一年间就连续发表了6篇影响因子高于10的全光谱流式分选文章。接下来，选取其中3篇文章进行解读赏析。
图1 – 费城儿童医院全光谱流式分选文章汇总1-6
揭秘肺部损伤后的再生机制（IF：44.8）
肺泡中包含多种上皮细胞、间充质细胞、内皮细胞等，严重的肺部损伤状态下会发生异常修复过程，来源于气道的krt5+基底细胞迁移、增殖并侵入受损的肺泡区，与Pdgfrb+间充质细胞形成损伤诱导的组织生态位，这一过程导致气道基底干细胞和肺泡2型干细胞在修复过程中相互竞争。本研究基于Cytek Aurora CS全光谱分选型流式细胞仪分选了tdTomato+ Pdgfra/Pdgfrb间充质细胞、CD31+内皮细胞、CD326+间充质细胞、CD45+免疫细胞，并对接单细胞测序平台，发现损伤诱导的组织生态位由间充质细胞增殖和Notch信号通路所调控，这为临床治疗提供了靶点参考。另外，tdTomato+ AT2（肺泡2型）细胞和YFP+ Pdgfra+细胞经过分选，在体外培养成小鼠肺泡类器官，充分展现了全光谱流式分选仪的高活性分选性能。
图2 – 损伤诱导的间充质-上皮细胞生态位可协调肺的再生反应
首次发现NF-κB信号与X染色体失活
存在相关性（IF：17.8）
X染色体失活（XCI）是指女性细胞抑制X连锁基因表达，以平衡两性之间基因剂量的过程。本研究发现，小鼠和人T细胞中XCI的维持受到T细胞受体活化与下游NF-κB信号通路的调控，抑制NF-κB会阻止X染色体失活特异性转录本（Xist）RNA的重新定位，并阻碍组蛋白对失活X染色体的修饰。研究人员设计了15色方案，使用5激光Cytek Aurora CS全光谱分选型流式细胞仪分别对于女性的健康供者和NF-κB1突变患者的中央/效应记忆CD4+ T细胞、CD8+T细胞进行分选，分选后的T细胞经过刺激培养，对接荧光显微镜平台检测Xist RNA荧光原位杂交（FISH）和失活X染色体的组蛋白修饰定位。Cytek Aurora CS全光谱分选型流式细胞仪能够为高维方案带来分辨率质的飞跃，广泛兼容各种荧光染料包括新型荧光染料，以及各类荧光蛋白，还兼容传统流式的方案，并同时保留极大的方案可扩展空间。
图3 – 分选CD4+ T细胞对接RNA FISH与组蛋白修饰检测
NAD水平可预测淋巴细胞克隆性扩增的
动态变化（IF：17.8）
适应性免疫需要从异质性细胞库中扩增高亲和力的淋巴细胞。淋巴细胞的活化伴随着转录和代谢变化，进而产生与抗原亲和力相关的细胞分裂。但是，具体是由什么代谢物来控制亲和力驱动的淋巴细胞增殖过程尚不清楚。本研究发现烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）是T细胞受体亲和力依赖的代谢重编程中的重要参与者，NAD水平能够预测T细胞结束休眠的时间以及T细胞增殖能力。研究人员使用Cytek Aurora CS全光谱分选型流式细胞仪，整个分选过程中维持进样仓和分选仓37℃温控条件，基于特色的自发荧光识别功能将小鼠CD8+ T细胞NAD(P)H的自发荧光区分为低、中低、中高、高不同水平，分选后对接细胞培养并检测增殖状态，充分证明了高纯度与高活性的卓越分选性能。
图4 - 单细胞NADH水平差异引起淋巴细胞增殖反应异质性
总结展望
Cytek Aurora CS全光谱分选型流式细胞仪 作为世界首/个石英杯激发的全光谱流式分选平台，搭载Cytek专利全光谱分析（FSP™）与高性能分选技术为一体，仪器提供了卓越的灵敏度、分辨率和前所/未有的灵活性，为感染性疾病、肿瘤免疫、微生物学、海洋生物学、神经生物学、炎性疾病、发育生物学等众多领域学科发展打造了高水平的研究平台。
参考文献
1Jones, D. L. et al. An injury-induced mesenchymal-epithelial cell niche coordinates regenerative responses in the lung. Science (New York, N.Y.) 386, eado5561, doi:10.1126/science.ado5561 (2024).
2Forsyth, K. S. et al. Maintenance of X chromosome inactivation after T cell activation requires NF-κB signaling. Science immunology 9, eado0398, doi:10.1126/sciimmunol.ado0398 (2024).
3Turner, L. et al. Single-cell NAD(H) levels predict clonal lymphocyte expansion dynamics. Science immunology 9, eadj7238, doi:10.1126/sciimmunol.adj7238 (2024).
4Doan, A. E. et al. FOXO1 is a master regulator of memory programming in CAR T cells. Nature 629, 211-218, doi:10.1038/s41586-024-07300-8 (2024).
5Paneru, B. D. et al. Myeloid-derived miR-6236 potentiates adipocyte insulin signaling and prevents hyperglycemia during obesity. Nature Communications 15, 5394, doi:10.1038/s41467-024-49632-z (2024).
6Leek, C. et al. Role of sex as a biological variable in neonatal alveolar macrophages. Redox biology 75, 103296, doi:10.1016/j.redox.2024.103296 (2024).