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AI加持Amnis®成像流式系统,辅助MDS诊断的强大帮手!

183 人阅读发布时间:2025-03-17 15:53

背景介绍

骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Neoplasm,MDS)是起源于造血干细胞的恶性骨髓疾病,通常表现为无效造血,难治性血细胞减少,有较高的概率转为急性髓系白血病(AML)。

但是MDS的诊断是非常具有挑战性的,对某些症状不明显的病人来说,确诊MDS将变得异常困难。这种情况下,往往需病理专家用眼睛来仔细观察病人骨髓涂片,这可能会使诊断结果因人为因素而出现差异性。因此,急需一种准确的、可标准化且可重复的诊断MDS的方法

 

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图1:MDS异常增生的表现

Amnis®成像流式助力MDS诊断

Amnis®成像流式细胞术是对现有的仅依靠于人工的形态学诊断的有力补充,无需预先富集细胞,通过荧光标记,可仅分析具有相关免疫表型的细胞。并且可在较短时间内获取和统计大量细胞的信息,因此可高效和准确地进行实验分析,还可实现自动化和标准化,并能极大降低人为操作引起的差异。

 

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图2:Amnis®成像流式可作为现有MDS诊断方法的有力补充

Amnis®成像流式细胞仪

Cytek® Amnis® ImageStream®X Mk II成像流式细胞仪结合了成像和流式两种技术的优点,既可快速捕获每一个细胞的图像,也能获取具有统计学意义的数据,并且流式图上每一个点都可以和细胞图像一一对应(图3)。

 

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图3:眼见为实,Amnis®的流式数据和图像数据一一对应

 

成像流式可支持明场,SSC以及多达10个荧光通道的成像。并且还可以配置20X/40X /60X的物镜组,可对不同大小的细胞成像,并可以提供更高的分辨率。

 

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图4:Cytek® Amnis® ImageStream®X Mk II

成像流式细胞仪光学设置图

 

Amnis®系统使用IDEAS®软件进行分析,在该软件中使用mask来定义细胞的特定区域。例如定义整个细胞的区域,细胞膜的区域,细胞核的区域等(图5)。此外,Mask还可结合形状、尺寸、位置、信号强度和纹理等细胞的特征参数(图6),对细胞进行量化统计分析。

 

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图5:Mask定义细胞特定区域

 

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图6:IDEAS®软件中的特征参数类型

 

在数据分析上,除了标配的IDEAS®软件以外,在IDEAS®软件中可以配置Machine Learning模块用于深度分析,此外还可以配置Amnis® AI软件,以实现智能化的自动分析。

Machine learning助力识别不同细胞类型

在确诊MDS时,按照传统检测方法,病理学专家会对骨髓涂片上的双核红细胞进行计数,这个过程十分耗时且差异性较大。
借助Machine Learning功能进行分析时,为了准确识别和计数双核细胞,可在分析软件中生成一个双核区域(BNE mask), 结合BNE mask和点计数特征功能可实现对双核红细胞的自动计数。
在软件的实际分析过程中,除了能识别真正的双核红细胞(真阳性,True positive,TP),同时还可能会识别黏连体(True positive),或是某些不规则核型的单核细胞(假阳性,False positive,FP)。
为了将真阳性和假阳性群体区分开来,先手动标记出一些FP细胞和TP细胞,随后使用Machine Learning计算出大量的特征性区分参数用以区别这两类群体,可从大量细胞图片库中找到FP群体。

接着通过类似的步骤,使用Machine Learning进行计算,从FP群体中可区分出真正的双核红细胞和黏连体。识别出双核红细胞后,可对其进行计数,用以帮助病理学家确诊MDS。

 

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图7:使用Machine Learning进行数据分析

强大的Amnis® AI软件用于辅助检测MDS

研究者Rosenberg利用Machine Learning发表了MDS相关文章以后,Amnis® AI软件上市了。随后,她也利用Amnis® AI软件来区分MDS病人骨髓中的双核红细胞,黏连体和不规则核型的单核红细胞。

Amnis® AI软件的数据分析流程十分简单,利用从Amnis® IDEAS®上获取的图像数据,对卷积神经网络模型(CNN)进行训练,使其准确区分图片集中的TP,FP以及黏连体(图8)。

 

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图8:Amnis® AI软件数据分析流程

 

在对CNN的具体训练过程中(图9),有如下步骤:1)向Amnis® AI软件中导入从7个MDS病人上获取的数据集;2)给明场,CD235a和DNA分配合适的图像通道;3)导入785个经IDEAS®软件分析的潜在双核细胞,并且手动标记三种“ground truth”细胞-双核红细胞,黏连体和不规则核型的单核细胞;4)利用软件中聚类算法(基于形态学的类似程度,给相似细胞分组)或者预测算法(对未分类的细胞,预测最合适的模型分类),来快速获取更多准确分类的“ground truth”细胞;5)对CNN算法模型进行训练;6)Amnis® AI软件给出CNN算法分类结果的准确度,对其进行评估,发现利用Amnis® AI分类的准确度高达94%(图10)。

 

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图9:对CNN算法模型进行训练

 

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图10:利用Amnis® AI分类的准确度

Amnis® AI软件助力MDS诊断的效果极/佳

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大部分手动分类的细胞也可被Amnis® AI软件或Machine Learning功能分析和识别出来;

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Amnis® AI软件的分析结果中找出了更大比例的真正的双核红细胞;

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Amnis® AI软件的分析结果中,假阴性的双核红细胞占比很低。

使用Amnis® AI软件进行数据分析的优势

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准确的分析结果:结合强大的CNN算法和随机森林算法,可实现自动化分析,并且实现准确的分析结果;

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分析结果高度一致:显著提高分析结果的一致性和可重复性,极大减少了不同实验者分析的主观性,也可避免不同时间点分析的差异性;

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节省大量宝贵时间:只需简单的标记少量细胞样本,系统即可生成分类模型,可扩展分析海量数据,可避免重复性工作,并极大程度减少手动分类细胞的工作量,节约大量时间;

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应用场景广泛:可在多个应用中使用Amnis® AI软件进行分析,极大助力高水平文献的发表;

5

 

操作简单:Amnis® AI界面直观,分析操作流程也十分简单,即使是没有计算机专业背景的人也能很快上手;

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可视化验证分析结果:分析结果为可视化交互式图库,用户可直观验证分类的准确性;

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极大的临床应用价值:Amnis® AI拥有极大的临床应用价值,可增强Amnis®成像流式细胞仪在日常诊断分析上的应用。

更多细节讲解,欢迎点击讲座视频回放:

 

 
 

 

参考文献:

Rosenberg CA, Bill M, Rodrigues MA, Hauerslev M, Kerndrup GB, Hokland P, Ludvigsen M. Exploring dyserythropoiesis in patients with myelodysplastic syndrome by imaging flow cytometry and machine-learning assisted morphometrics. Cytometry B Clin Cytom. 2021 Sep;100(5):554-567. doi: 10.1002/cyto.b.21975.

Rosenberg CA, Rodrigues MA, Bill M, Ludvigsen M. Comparative analysis of feature-based ML and CNN for binucleated erythroblast quantification in myelodysplastic syndrome patients using imaging flow cytometry data. Sci Rep. 2024 Apr 23;14(1):9349. doi: 10.1038/s41598-024-59875-x. Erratum in: Sci Rep. 2024 Jun 6;14(1):13024. doi: 10.1038/s41598-024-63712-6.

 

 

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